聚（ADP-核糖）聚合酶（PARPS）在DNA损伤修复与细胞凋亡中发挥着重要作用，而PARP抑制剂也是首个获准上市的靶向DNA损伤修复机制的抗癌药物。

    复旦大学吴家雪研究员团队基于小分子芯片（>3000种）的高通量筛选，找到并证明EGCG是PARP16的抑制剂。EGCG通过抑制ER应激诱导的PERK磷酸化和UPR相关基因的转录，导致ER应激条件下癌细胞凋亡的剧烈增加。该研究结果已在《Cell Death Discovery》杂志在线发表。

由于ECG和EGCG具有非常相似的结构，研究者猜测提高EGCG也可能抑制PARP16活性，并做了一系列实验来验证这一猜想。结合动力学常数显示PARP16结合ECG和EGCG的解离常数（Kd）分别为3.41和6.16 nM，表明它与ECG和EGCG具有高结合亲和力（图2 A）。

通过体外ADP-核糖基化试验检测了ECG和EGCG对PARP16活性的抑制效率，在体外相同条件下EGCG比ECG更有效地抑制PARP16活性（图2 B）。此外，EGCG和ECG对PARP16活性的IC50分别为14.52和47.18μM（图2 C），这些结果表明EGCG是PARP16的潜在抑制剂。

3. EGCG抑制ER应激诱导的PERK磷酸化

前期研究表明PARP16对于ER应激条件下的PERK活化是必需的，所以推测EGCG通过抑制PARP16的活性，从而影响EGCG抑制ER应激诱导的PERK磷酸化。

为了验证该假设，通过单独用EGCG，衣霉素（TUN）、BFA或EGCG与BFA、TUN组合处理QGY-7703和Hela细胞来检测PERK以及eIF2α的磷酸化。如图3 A和B所示，与对照相比，BFA和TUN显著诱导PERK和eIF2α的磷酸化，并且EGCG处理条件下有效地抑制了这种诱导。这些结果表明EGCG抑制ER应激诱导的PERK和eIF2α的磷酸化。

图3. EGCG抑制ER应激诱导的PERK信号传导

（A）和（B）对p-PERK（Thr 981），p-eIF2α（Ser 51），eIF2α（总）和微管蛋白的抗体进行免疫印迹。* P<0.05，** P<0.01。 BFA，Brefeldin 处理；p-PERK，磷酸化PETK；p-eIF2α，磷酸化eIF2α; TUN，衣霉素处理；UT，未经处理。

4.EGCG抑制ER应激诱导的UPR相关基因的转录

在Hela细胞中用EGCG，TUN和BFA单独处理或EGCG与BFA和TUN结合处理后，通过定量实时PCR检测UPR相关基因的表达。如图4A和B所示，与对照相比，BFA和TUN显著诱导UPR相关基因的表达，并且用EGCG处理Hela细胞抑制了这种诱导，进一步表明EGCG抑制ER应激诱导的UPR。

图4.EGCG减弱ER应激诱导的UPR相关基因的表达

（A）在Hela细胞中，EGCG和BFA处理条件下UPR相关基因的表达；（B）在Hela细胞中，EGCG和TUN处理条件下UPR相关基因的表达。

5.EGCG通过PARP16增强ER应激诱导的细胞凋亡

研究人员通过流式细胞术检测了在EGCG处理条件下，对TUN或BFA诱导PARP16野生型和缺陷细胞凋亡的影响。如图5所示，EGCG处理仅对PARP16野生型的细胞凋亡有影响，对PARP16缺陷细胞的凋亡无影响。

图5. EGCG通过PARP16增强ER应激诱导的细胞凋亡